آماده‌سازی بافت‌های گیاهان دارویی به منظور مطالعات میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM)

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسنده

گروه باغبانی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد

چکیده

از آنجایی که کرک‌ها در گیاهان دارویی بعنوان محلی برای سنتز و ذخیره اسانس است. مطالعه مورفولوژی آنها علاوه بر اهمیت تاکسونومی بعلت کاربرد گسترده اسانس در صنایع داروسازی، آرایشی و بهداشتی دارای اهمیت است. کر‌‌ک‌های ترشحی بطور گسترده‌ای در سراسر بخش‌های رویشی و زایشی گیاهان خانواده نعناییان توزیع شده‌اند و ترشحات آنها عمدتا باعث اهمیت آنها شده است. بنابراین در فرآیند آماده‌سازی بافت‌های بیولوژیکی (گیاهی) برای مطالعات میکروسکوپ الکترونی(SEM) شناسایی یک روش که اندازه و مورفولوژی کرک ترشحی را حفظ کند، می‌تواند بسیار مفید واقع شود. در این مطالعه دو روش آماده‌سازی کرک در برگ و کاسبرگ سه گونه گیاه دارویی از جنس "پونه‌سا" شامل: Nepeta fissa, Nepeta assurgens, Nepeta eremophilla مطالعه شد. قطعات برگ و کاسبرگ پس از شستشو با آب مقطر در محلول تثبیت‌کننده FAA شامل (فرمالدهید 7/3 درصد، اتانول 50 درصد و اسیداستیک 5 درصد) به مدت 3 ساعت در دمای 4 درجه سانتی‌گراد قرار داده شد. پس از شستشو با بافرفسفات سپس درسری‌های صعودی متانول (30، 50، 70، 95 و 100 درصد) به مدت 5 دقیقه در هر مرحله آبگیری شده و به استاب ‌مخصوص چسبانده شدند و پس از پوشش‌دهی با پالادیوم تصویربرداری با استفاده از میکروسکوپ SEM انجام شد. روش‌های استفاده شده بسته به گونه گیاهی و ضخامت بافت نتایج متفاوتی نشان دادند. بطور کلی متانول به عنوان روشی سریع و آسان جهت حفظ اندازه و چروکیدگی بافت‌های گیاهی بهتر است.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Preparation of medicinal plants tissues for scanning electron microscopy (SEM)

نویسنده [English]

  • FatemehZahra Amirmohammadi
Department of Horticulture College of Agriculture Ferdowsi University of Mashhad Mashhad Iran
چکیده [English]

Since the glandular trichome in the medicinal plants is the location for storage and synthesis of essential oils, glandular trichomes are widely distributed all of the plant organs of the Lamiaceae, their secretions contribute largely to its great importance. They are the primary secretory organs of these plants, and their structures can vary widely among species. Therefore, their morphology could be, addition of taxonomical importance, to have essential oils which are widely used in pharmaceutical and cosmetic industry. Therefore, identification of a protocol that would preserve tissue size and morphology by usual methods can be useful. In this study compared two of the method by quantifying changes in size and trichome shrinkage percent at two different organs (leaf and calyx) in three Nepeta species studied: Nepeta. fissa, Nepeta. assurgens and Nepeta. eremophilla. Plant materials washed in distillated water, then immersed in FAA fixative (3.7% v/v formaldehyde, 50% ethanol, 5% acetic acid) and was then fixed (approximately 3 h) at 4°C. Tissue was rinsed three times in sodium phosphate buffer before dehydrating in a methanol series (30%, 50%, 70%, 95%, and 100%), 5 min each step. Specimens were mounted onto SEM stubs and coated with paladium. The method used depend on the type of plant species and different organs, in this study shows that generally the fixation and dehydration with methanol is a quick and simple method for preservation the size and shrinking of plant the tissues.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Nepeta
  • SEM
  • Shrinking
  • Trichome