اثبات بیماری‌زایی یک بیماری نوظهور در بامیه ناشی از فیتوپلاسمای گروه 16SrVI-A در شمال شرق ایران

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 استادیار پژوهشی، بخش تحقیقات گیاه‌پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان خراسان رضوی، سازمان تحقیقات، آموزش

2 بخش تحقیقات گیاه‌پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان خراسان رضوی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی،

10.22092/mpt.2025.370008.1196

چکیده

چکیده
بامیه (Abelmoschus esculentus) گیاه دارویی مهم متعلق به خانواده پنیرکیان (Malvaceae) است. در فروردین‌ماه سال 1402، علایم پیچیدگی، خمیدگی یا چروکیدگی کپسول میوه، ناهنجاری‌های رشدی، کوتاه شدن میانگره‌ها، کوتولگی و جارویی‌شدن شاخه‌ها در گیاهان کشت‌شده در گلخانه‌های شهرستان چناران استان خراسان‌رضوی مشاهده شدند. جهت اطمینان از بیماری‌زایی و جداسازی عامل بیماری، انتقال بیمارگر از بامیه به بوته‌های بذری پروانش (Catharanthus roseus)، به کمک گیاه انگل سس (Cuscuta campestris) در گلخانه صورت گرفت. این گیاهان بعد از یک‌ماه علایم فیلودی را نشان دادند. جهت شناسایی عامل بیماری، استخراج دی.ان.ای (DNA)، از رگبرگ‌های میانی و دمبرگ پنج گیاه بامیه بیمار و سه گیاه سالم (شاهد منفی) با روش (CTAB) انجام شد. واکنش‌های زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) مستقیم و آشیانه‌ای به ترتیب با استفاده از جفت آغازگرهای عمومی، P1/P7 و R16F2n/R16R2 انجام شدند. قطعات تکثیرشده با اندازه مورد انتظار، از محصولات PCR هر پنج گیاه بیمار به‌دست آمدند. تجزیه و تحلیل‌های فیلوژنتیک و چند شکلی طولی قطعات برشی مجازی (Virtual RFLP) بـا استفاده از برنامه iPhyClassifier و در شرایط آزمایشگاهی با آنزیم‌های برشی نشان دادند که فیتوپلاسمای مرتبط با بیماری غلاف پیچ‌خورده بامیه بیشترین شباهت را با Candidatus phytoplasma trifolii متعلق به گروه افژولش شبدر (Clover proliferation group, 16SrVI-A) دارد (شماره دسترسی OR784662). این تحقیق که داده‌های تکمیلی نسبت به گزارش اولیه چاپ شده از آن را ارائه کرد، نه تنها نشان‌دهنده گسترش دامنه میزبانی فیتوپلاسماها در ایران است، بلکه ضرورت پژوهش‌های بیشتر برای شناسایی سایر میزبان‌ها و تعیین دقیق پراکنش این فیتوپلاسماها در دیگر نقاط کشور را به‌خوبی روشن می‌کند.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Demonstrating the ability of Phytoplasma group 16SrVI-A to cause an emerging disease in okra in northeastern Iran

نویسندگان [English]

  • Sara Gharouni Kardani 1
  • Elahe Taheri 2
1 Faculty member of Plant Protection Research Department, Khorasan Razavi Agricultural and Natural Resources Research and Education Center, (AREEO), Mashhad, Iran
2 Plant Protection Research Department, Khorasan Razavi Agricultural and Natural Resources Research and Education Center, AREEO, Mashhad, Iran
چکیده [English]

Okra (Abelmoschus esculentus) is an important medicinal plant belonging to the Malvaceae family. In April 2023, new symptoms in greenhouse-grown okra, including twisted, curled, or wrinkled fruit capsules, growth abnormalities, shortened internodes, dwarfing, and witches’ broom, were observed in the Chenaran district of Khorasan Razavi province. To confirm the pathogenicity and identify the causal agent, the pathogen was transferred from infected okra plants to periwinkle seedlings (Catharanthus roseus) using dodder (Cuscuta campestris) under greenhouse conditions. After one month, the periwinkle plants exhibited phyllody symptoms. DNA was extracted from the midribs and petioles of five infected okra plants and three healthy plants (negative controls) for pathogen identification using the CTAB method. Direct and nested polymerase chain reaction (PCR) assays were performed using universal phytoplasma primers, P1/P7 and R16F2n/R16R2, respectively. The expected amplicons were obtained from PCR products of all five infected plants. Phylogenetic and virtual RFLP analyses using the iPhyClassifier software and in vitro RFLP with restriction enzymes revealed that the phytoplasma associated with okra's twisted pod disease closely resembled Candidatus phytoplasma trifolii from the Clover proliferation group (16SrVI-A) (accession number OR784662). This study, which provided additional data to the initial published report, not only demonstrates the expanding host range of phytoplasmas in Iran but also emphasizes the need for further research to identify other hosts and determine the precise distribution of these phytoplasmas in different parts of the country and worldwide.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Clover proliferation
  • Curled pod
  • Okra
  • Phyllody
  • Prokaryote